C8 ve C18 kolonları, farmasötik ve gıda analizleri başta olmak üzere en çok kullanılan HPLC kolon türleridir. Peki ya bu kolonlar hangi açılardan birbirleri ile ayrışır ?
Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi (HPLC) sistemi, bir karışımdaki her bileşeni tanımlamak, ayırmak ve miktarını belirlemek için kullanılan bir analitik kimya tekniğidir. C8 ve C18, bir kolonun bağlı yüzeyindeki alkil zincirini ifade eder ve her ikisi de yüksek performanslı sıvı kromatografisi sisteminde kullanılır. Bu iki kolonun bazı benzerlikleri vardır, ancak bazı farklılıkları da bulunur. C18 ve C8 arasındaki bazı farklar aşağıda açıklanmıştır.
Octadecylsilane (C18), 18 karbon atomuna sahiptir. Öte yandan, Octylsilane (C8) sadece 8 karbon atomuna sahiptir ve bu kolonlar silikaya (Si) bağlıdır. C18, C8’den daha fazla tutma eğilimindedir. Yani, benzer bir bileşik iki kolon üzerinden geçirildiğinde, C8’de daha hızlı ve C18’de daha yavaş elüsyona uğrar. Bu, kolonun bir birim yüzey alanında daha çok tutunmasından kaynaklanır.
C18, C8’den daha yoğundur. Daha yoğun tutunma, mobil fazdaki molekülün birim uzunluk başına geçmesi gereken yüzey alanını artırır. Ayrıca, hareketli faz ve sabit faz arasındaki etkileşim süresini artırarak daha karmaşık moleküller için daha büyük bir ayırma yeteneği sağlar.
Başka bir deyişle, C18 genellikle hidrofobik olan ve polar olmayan bileşikleri yüksek oranda tutan Octadecyl zincirlerine sahiptir. Karbon zincirinin uzunluğu daha uzundur. Buna karşılık, C8 Octyl zincirlerine sahiptir ve bu nedenle C18 ile aynı bileşik kullanıldığında daha az tutulur.
Kısa tutma süresi gerektiğinde C8 tercih edilir. C8 kolonun Daha düşük hidrofobikliği, polar olmayan bileşiklerin daha hızlı tutulmasına neden olur. Bu nedenle, polar olmayan bileşikler C8 ile C18’e göre kolon boyunca daha hızlı hareket eder.
Kullanım Alanı
C18 HPLC kolonu, çevre bilimi, farmasötik endüstriler, radyoanalitik laboratuvarlar ve kimyasal analizlerde yaygın olarak kullanılır. Kimyasal karışımların bireysel bileşenlerini veya radyoaktif/etiketli molekülleri analiz etmek için kullanılırlar.
C18 kolon ise, uzun zincirli yağ asitleri gibi bileşikleri, nispeten küçük organik bileşiklere kıyasla ayırmada daha iyidir. Çoğu üretici tarafından büyük miktarlarda üretildiği için nispeten ucuzdur.
C8 ve C18 birçok ortak unsura sahiptir. Ancak, kapsamlı araştırmalar, HPCL’de kullanılan C8 ve C18’in bazı belirgin farklılıklarını belirlemeye yardımcı olmuştur. Bu iki bileşiğin yapıları neredeyse benzerdir. Yani, C18 için OH-Si-C18 ve C8 için OH-Si-C8’dir.
Kolonlar Arasındaki Farklar
Yukarıda belirtilen yapısal farklılıklar göz önüne alındığında, temel farklılıklarını netleştirmek daha kolaydır.
- C18, 18 karbon atomuna sahipken, C8 sadece 8 karbon atomuna sahiptir.
- C18 daha uzun bir karbon zincirine sahipken, C8 daha kısa bir zincire sahiptir.
- C18 daha yüksek tutma kapasitesine sahipken, C8 daha kısa tutma kapasitesine sahiptir.
- C18 daha yüksek hidrofobikliğe sahipken, C8 daha düşük hidrofobikliğe sahiptir.
Yukarıda listelenen temel HPLC kolon karşılaştırması ile, analizleri gerçekleştirirken hangi kolonun kullanılacağını bilmek daha kolaydır.
